|
|
Detekce a genotypizace kmenů Helicobacter pylori ve Waldeyerově lymfatickém okruhu a jeho vliv na vznik patologií v této oblasti
Nártová, Eva ; Astl, Jaromír (vedoucí práce) ; Smilek, Pavel (oponent) ; Slípka, Jaroslav (oponent)
Práce se zabývá studiem přítomnosti Helicobacler pylori (HP) v lymfatické tkáni Waldeyerova okruhu u skupiny dospělých a dětských pacientů a možnou souvislostí se vznikem benigních onemocnění v této oblasti ( chronická tonzilitida, adenoidní vegetace a OSAS) a se vznikem karcinomu tonzily. V naší práci jsme potvrdili hypotézu, že HP se nachází v lymfatické tkání Waldeyerova okruhu stejně tak jako v žaludku a lymfatická tkáň oropharyngu a epipharyngu tak plní roli extragastrického zdroje HP. Předpokládá se, že v lymfatické tkání Waldeyerova okruhu působí infekce HP podobnými imunitními a zánětlivými procesy jako v žaludku, neboť se jedná o lymfatickou tkáň vázanou na sliznici. V dizertační práci jsme pomocí metody real-time PCR zjistili vysoký výskyt DNA HP v adenoidní a tonzilámí tkáni. Ve skupině benigních onemocnění byly nejčastěji detekovány genotypy Cag-VacAslbml a CagA-VacAslbm2. Ve skupině pacientů s karcinomem tonzily byl nejčastěji detekován genotyp CagA- VacAslbml. Genotypizací zjištěné kmeny HP vykazovaly rozdíly v porovnání s převládajícimi kmeny, které lze nejčastěji nalézt v žaludku. Prokázané kmeny se liší především menší expresí CagA genu. Byly tak detekovány mé1iě virulentní kmeny. Předpokládá se, že dlouhodobá kolonizace lymfatické tkáně orofaryngu a epipharyngu méně virulentními...
|
|
|
Diagnostika Helicobactera pylori pomocí histologického a imunohistochemického vyšetření
BURDOVÁ, Anna
Hlavním tématem této bakalářské práce je bakterie Helicobacter pylori (HP), její výskyt v žaludeční sliznici a způsob její diagnostiky v laboratoři pomocí histologického a imunohistochemického vyšetření. V teoretické části se zabývám samotnou bakterií, její morfologií a hlavně diagnostikou. Způsobů, jak zjistit přítomnost této bakterie, je mnoho, nejčastější rozdělení je na invazivní testy, kam řadíme histologické vyšetření, kultivaci a ureázový test, a neinvazivní testy, kde můžeme využít sérologii a dechové testy. Popisuji zde také anatomii a histologickou stavbu žaludku a poté navazuji na patologii žaludku, kde jsem se zaměřila na nejčastější onemocnění způsobené Helicobacterem pylori, akutní a chronické gastritidy a nádory žaludku. Je zde zahrnut celý proces histologického vyšetření, od příjmu vzorku na oddělení, přes fixaci s příklady různých fixačních prostředků, k zalévání, krájení a barvení, kde popisuji i druhy barvení, které jsou využité v praktické části. Na konci teoretické části se zabývám i tématem imunohistochemie. Jedním z cílů praktické části je osvojení si základního rutinního barvení Hematoxylin eosin, speciálního barvení Giemsa a imunohistochemického vyšetření antigenu pomocí polyklonální protilátky Anti-Helicobacter pylori. Dalším cílem je zmapování výskytu infekce Helicobacter pylori dle věkových skupin, pohlaví vyšetřovaných pacientů a ročního období. Stanovila jsem si dvě výzkumné otázky, které bych ráda zodpověděla. Výsledky vyšetření 38 žaludečních biopsií získaných v roce 2022 budou statisticky zpracovány a doplněny mikrofotografiemi vybraných vzorků.
|
|
|
Helicobacter pylori a aktuální poznatky v léčbě
Hemmerová, Amálie ; Vejsová, Marcela (vedoucí práce) ; Janďourek, Ondřej (oponent)
UNIVERZITA KARLOVA Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Zdravotnická bioanalytika ̶ Zdravotní laborant Bakalářská práce Autor: Amálie Hemmerová Vedoucí práce: Mgr. Marcela Vejsová, Ph.D. Název: Helicobacter pylori a aktuální poznatky v léčbě Tato práce je zaměřená na patogenní Helicobacter pylori, která hraje důležitou roli v řadě onemocnění v oblasti gastroduodena. Cílem této práce je shrnout dosud známé informace týkající se Helicobacter pylori a uvést některé aktuální poznatky týkající se její léčby. Helicobacter pylori je gramnegativní mikroaerofilní spirální tyč, která žije pod vrstvou sliznice v oblasti příznivého neutrálního pH a vyvolává zánětlivé změny na epitelu žaludeční stěny. Infikována je až polovina světové populace. Aby byla léčba úspěšná, je důležité nalézt vhodnou terapii. Donedávna byla první volbou standardní trojkombinace klarithromycin/metronidazol, amoxicilin a PPI. Její účinnost však byla ve většině zemí snížena na úroveň nižší, než je doporučená míra eradikace (< 80 %). Příčinou selhání byla rezistence na klarithromycin/metronidazol. Čtyřkombinace s bizmutem jsou ve většině zemích účinné. Jsou využívány jak k léčbě první volby, tak jako záchranná terapie po selhání standardní trojkombinace. 14denní čtyřkombinace s bizmutem byla...
|
|
|
Detekce a genotypizace kmenů Helicobacter pylori ve Waldeyerově lymfatickém okruhu a jeho vliv na vznik patologií v této oblasti
Nártová, Eva ; Astl, Jaromír (vedoucí práce) ; Smilek, Pavel (oponent) ; Slípka, Jaroslav (oponent)
Práce se zabývá studiem přítomnosti Helicobacler pylori (HP) v lymfatické tkáni Waldeyerova okruhu u skupiny dospělých a dětských pacientů a možnou souvislostí se vznikem benigních onemocnění v této oblasti ( chronická tonzilitida, adenoidní vegetace a OSAS) a se vznikem karcinomu tonzily. V naší práci jsme potvrdili hypotézu, že HP se nachází v lymfatické tkání Waldeyerova okruhu stejně tak jako v žaludku a lymfatická tkáň oropharyngu a epipharyngu tak plní roli extragastrického zdroje HP. Předpokládá se, že v lymfatické tkání Waldeyerova okruhu působí infekce HP podobnými imunitními a zánětlivými procesy jako v žaludku, neboť se jedná o lymfatickou tkáň vázanou na sliznici. V dizertační práci jsme pomocí metody real-time PCR zjistili vysoký výskyt DNA HP v adenoidní a tonzilámí tkáni. Ve skupině benigních onemocnění byly nejčastěji detekovány genotypy Cag-VacAslbml a CagA-VacAslbm2. Ve skupině pacientů s karcinomem tonzily byl nejčastěji detekován genotyp CagA- VacAslbml. Genotypizací zjištěné kmeny HP vykazovaly rozdíly v porovnání s převládajícimi kmeny, které lze nejčastěji nalézt v žaludku. Prokázané kmeny se liší především menší expresí CagA genu. Byly tak detekovány mé1iě virulentní kmeny. Předpokládá se, že dlouhodobá kolonizace lymfatické tkáně orofaryngu a epipharyngu méně virulentními...
|
|
| |
|
|
Rezistence kmenů Helicobacter pylori na antimikrobiální léčbu
Moravcová, Monika ; Keil, Radan (vedoucí práce) ; Nyč, Otakar (oponent)
Helicobacter pylori (dále H. pylori) je gramnegativní bakterie, která kolonizuje žaludeční sliznici člověka. Je jasně prokázána její role v etiopatogenezi chronické gastritidy, vředové choroby gastroduodena, MALT-lymfomu a v souvislosti se vznikem karcinomu žaludku byla označena Světovou zdravotnickou organizací (WHO) za karcinogen I. třídy. Infekci H. pylori lze diagnostikovat ze vzorků žaludeční sliznice odebraných při endoskopickém vyšetření za použití metody rychlého ureázového testu, mikroskopického vyšetření nebo kultivace bioptického materiálu, anebo lze aplikovat techniky neinvazivní (dechový test s 13 C značenou ureou, popř. detekci antigenu HpSA ve stolici). Efektivní terapie infekce H. pylori spočívá v podávání kombinace antibiotik a inhibitoru protonové pumpy. V posledních letech se v celosvětovém měřítku zvyšuje rezistence bakteriálních kmenů na užívaná antibiotika a tento trend můžeme sledovat také u H. pylori. Pokud úroveň rezistence překročí 20 % pro klaritromycin a 40 % pro metronidazol, nedoporučuje se tato antibiotika k léčbě infekcí vyvolaných touto bakterií používat. Ve skupině 61 pacientů Interní kliniky FN Motol, kteří během posledních dvou let podstoupili endoskopické vyšetření žaludku a duodena spojené s odběrem vzorku žaludeční sliznice, byla proto zjišťována citlivost...
|
|
|
Způsoby vyšetřování Helicobactera pylori a Kalprotektinu
LAVIČKOVÁ, Lucie
Helicobacter pylori je gramnegativní tyčka spirálovitého tvaru. Je přísně mikroaerofilní. Pro H. pylori je typická především mohutná ureázová aktivita. Kolonizuje povrch žaludeční sliznice a je prokázáno, že téměř polovina populace je jím kolonizovaná. Působením dalších faktorů dochází ke vzniku gastritidy, která později může přejít na chronickou formu. Na podkladě chronické gastritidy mohou vzniknout další závažné choroby gastroduodenální vředová choroba nebo adenokarcinom žaludku. H. pylori je vyhlášen za karcinogen 1. třídy. Kalprotektin je cytosolový protein. Uvolňuje se postupně z leukocytů po jejich aktivaci nebo lýze. Tvoří ho zejména monocyty a neutrofily. Koncentrace kalprotektinu ve vzorku stolice koreluje s množstvím leukocytů vyloučených do střevního lumen. Toto zjištění umožňuje lékařům dle stanovení hodnot kalprotektinu odhadnout stupeň infiltrace střevní sliznice leukocyty. Kalprotektin je svou vysokou citlivostí k přítomnosti střevních zánětů velmi vhodným ukazatelem při diagnostice tzv. nespecifických střevních zánětů. Cílem mé bakalářské práce je osvojení si identifikačních metod Helikobaktera pylori a kalprotektinu v rámci laboratorní praxe. Druhým cílem je osvojení si základní interpretace výsledků těchto metod. Stanovila jsem jednu hypotézu, kterou jsem se pokusila potvrdit. Dále jsem stanovila jednu výzkumnou otázku, na kterou jsem hledala odpověď. V teoretické části mé práce jsem se zaměřila na dosavadní poznatky o H. pylori a kalprotektinu. Popsala jsem současné metody jejich diagnostiky, onemocnění s nimi související a jejich léčbu. Praktickou část jsem prováděla na oddělení mikrobiologie v laboratoři Stafila spol s.r.o., kde jsem průkaz H. pylori ve vzorcích stolice vyšetřovala pomocí metody DIMA H. pylori test. Hladinu kalprotektinu jsem stanovovala pomocí metody BÜHLMANN Quantum Blue? Calprotectin Ascites. Sama jsem vyšetřovala v obou případech 25 vzorků. Veškeré práce jsem prováděla pod odborným dohledem MUDr. Cihlové a pracovníků laboratoře. Další část mé práce je věnována výsledkům. Vypracovala jsem statistiku četností výskytu H. pylori a pomocí statistických výpočtů vyvrátila svou stanovenou hypotézu. Zpracovala jsem také statistiku četností negativních, pozitivních a silně pozitivních výsledků hladin kalprotektinu ve vzorcích stolice a našla jsem odpověď na výzkumnou otázku.
|
|
|
Diagnostika a terapie infekce Helicobacter pylori
POSPÍŠILOVÁ, Michaela
H pylori je pohyblivá gramnegativní mikroaerofilní tyčka. Je charakteristická produkcí ureázy. Kolonizuje povrch žaludeční sliznice. Přítomnost bakterie vyvolá ve všech případech rozvoj chronické gastritidy, na jejímž podkladě mohou vzniknout další závažné choroby ? gastroduodenální vředová choroba nebo adenokarcinom žaludku. V roce 1994 byla tato bakterie vyhlášena za karcinogen 1. třídy. K diagnostice infekce H pylori využíváme invazivní a neinvazivní metody. Mezi invazivní metody patří kultivace, histologické vyšetření a rychlý ureázový test. K neinvazivním metodám řadíme dechový test s ureou značenou izotopem uhlíku 13C, test vyšetření antigenu HpSA ve stolici a sérologické vyšetření. H pylori je citlivý na betalaktamová antibiotika, proto by měla být základem léčebného schématu. Rezistence bakterie na tato antibiotika je výjimečná. Pokud je pacient alergický na batalaktamová antibiotika, můžeme je nahradit nitroimidazoly. Bakterie je citlivá i na makrolidy. Hlavním cílem mé bakalářské práce je osvojení si praktických znalostí správné laboratorní praxe při zpracování stolice a krevního séra při podezření na výskyt bakterie H pylori. Ve svojí práci jsem chtěla též popsat současné trendy v diagnostice a terapii infekce H pylori a zjistit četnost výskytu bakterie v závislosti na věku, pohlaví a ročním období. Zjištěné skutečnosti jsem porovnala s údaji uváděnými v odborné literatuře. Dále jsem zjišťovala v ambulancích českobudějovických gastroenterologů způsoby, jakými je v současné době diagnostikována a léčena gastroduodenální vředová choroba způsobená infekcí H pylori. Sběr dat pro kvantitativní výzkum jsem prováděla v mikrobiologické laboratoři Synlab czech s.r.o. v Českých Budějovicích. Tato laboratoř má spádovou oblast z celého jihočeského kraje. Vyšetřovaný materiál pocházel nejčastěji z ordinací praktických lékařů ale i lékařů jiných specializací. Sběr dat jsem prováděla od 1. ledna 2012 do 31. prosince 2012. Data jsem sbírala pomocí dvou vyšetřovacích metod. Jednalo se o metodu euroSCREEN HP a metodu EIA Helicobacter MONO IgG. Metoda euroSCREEN HP je založena na detekci antigenu HpSA ve stolici. EIA Helicobacter MONO IgG je imunoenzymatická metoda pro stanovení IgG protilátek proti H pylori v lidském séru nebo plazmě. Výzkumný soubor pro kvalitativní výzkum byl tvořen lékaři, kteří působí v gastroenterologických ambulancích v Českých Budějovicích. Z každé ambulance byl vybrán jeden lékař. Jako metodu zpracování získaných informací jsem zvolila řízený polostrukturovaný rozhovor. Získané rozhovory jsem zpracovala do kazuistik, na základě kterých jsem pak vytvořila kategorizační tabulky. V kvantitativním výzkumu se mi podařilo potvrdit všechny tři hypotézy. Ve vyšších věkových kategoriích pacientů byl vyšší výskyt infekce H pylori. Výskyt infekce H pylori nebyl závislý na pohlaví pacientů ani na ročním období. V kvalitativním výzkumu jsem zjistila, že českobudějovičtí gastroenterologové diagnostikují gastroduodenální vředovou chorobu především gastroskopicky s odběrem bioptických vzorků. Vzorky následně odesílají do mikrobiologické laboratoře na kultivaci, histologické vyšetření a rychlý ureázový test. Infekci H pylori léčí klasickou trojkombinační léčbou inhibitorem protonové pumpy, amoxicilinem a klaritromycinem. Při přecitlivělosti na betalaktamová antibiotika užívají trojkombinaci inhibitoru protonové pumpy, metronidazolu a klaritromycinu. S rezistencí na metronidazol a klaritromycin se setkávají občas. V případě rezistence provedou kultivaci se stanovením citlivosti na antibiotika. Efekt eradikační léčby ověřují vždy 6 až 8 týdnů po eradikaci pomocí kontrolní gastroskopie s odběrem bioptických vzorků, které jsou odeslány do mikrobiologické laboratoře. Někteří využívají i stanovení antigenu HpSA ve stolici.
|
|
|
Laboratorní diagnostika Helicobacter pylori
OBERMAJEROVÁ, Jana
Helicobacter pylori je gramnegativní zakřivená bakterie, ke svému růstu potřebuje mikroaerofilní prostředí a CO2. Z biochemických vlastností je důležitá produkce ureázy, katalázy, alkalické fosfatázy a fosfolipázy a dalších enzymů. Helicobacter pylori kolonizuje žaludeční sliznici v oblasti antra, při masivní infekci může přecházet i do těla žaludku. Podílí se na rozvoji zánětu žaludeční sliznice a to především sliznice antra, který ve většině případů přechází do chronické fáze. Podílí se na rozvoji peptického vředu duodena a žaludku, je prokázána souvislost s karcinomem a MALT lymfomem žaludku. K diagnostice infekce Helicobacter pylori slouží invazivní a neinvazivní metody. Pro invazivní metody je nutné odebrat bioptický vzorek žaludeční sliznice, který je určený pro histologické nebo mikrobiologické vyšetření. Mezi mikrobiologické metody patří mikroskopické vyšetření, rychlý ureázový test a kultivační vyšetření. Neinvazivní metody (dechový test, průkaz antigenu ve stolici) se zpravidla používají pro ověření eradikační léčby infekce. Tématem práce bylo porovnání jednotlivých mikrobiologických vyšetřovacích metod ? mikroskopie, kultivace a rychlého ureázového testu, které se pro diagnostiku Helicobacter pylori používají na Pracovišti bakteriologie Nemocnice České Budějovice, a.s. Materiálem byly bioptické vzorky žaludeční sliznice zaslané na Pracoviště bakteriologie v roce 2011. Vzorky byly nejčastěji odebírány na Gastroenterologickém oddělení a Dětském oddělení. Každý bioptický vzorek se vždy rozdělil na tři části pro jednotlivé metody. Z části vzorku se zhotovil mikroskopický preparát. K obarvení dle Grama se použil barvicí automat - systém MIRASTAINER?. Při pozorování v optickém mikroskopu (imerzním systémem při zvětšení 1000×) byly v případě pozitivního nálezu patrné štíhlé esovitě zahnuté gramnegativní tyčinky. Další část vzorku se použila pro ureázový test dle Christensena v tekutém médiu. Test se vyhodnotil následující den, pro pozitivitu svědčilo zčervenání média. Zbylá část vzorku se použila pro kultivační vyšetření. Materiál se naočkoval na diagnostickou kultivační půdu HPFA od firmy fa Dulab a souběžně na neselektivní krevní agar (pro vyloučení kontaminující flóry). Kultivace probíhala v mikroaerofilní atmosféře (docílilo se v LAS systému) 5-7 dní při 37 °C. V případě pozitivního kultivačního nálezu (pro H. pylori jsou typické drobnější, našedlé a částečně transparentní kolonie) se testovala citlivost k antibiotikům. Na Pracovišti bakteriologie Nemocnice České Budějovice, a.s. bylo v roce 2011 vyšetřeno 599 bioptických vzorků žaludeční sliznice. Infekce Helicobacter pylori byla prokázána u 161 pacientů. Z výsledků práce vyplývá, že citlivost kultivačního vyšetření je srovnatelná s mikroskopií. Nejnižší citlivost měl ureázový test. Infekce byla diagnostikována nejčastěji ve věkové skupině 40-59 let, z toho bylo 47,5 % mužů a 52,2 % žen. U 137 kmenů Helicobacter pylori byla stanovena citlivost k vybraným antibiotikům. 42 % kmenů bylo rezistentních k metronidazolu a 18 % kmenů k azitromycinu.
|
|
| |
host ::
RSS.